Este foarte important să fii conștient de faptul că datele produse cu un western blot sunt de obicei considerate a fi semi-cantitative. Acest lucru se datorează faptului că oferă o comparație relativă a nivelurilor de proteine, dar nu o măsură absolută a cantității.
Este Western blot calitativ sau cantitativ?
Western blot este o metodă cantitativă de încredere numai dacă sunt luate în considerare proprietățile și integritatea probei, specificitatea anticorpului față de proteina țintă și protocoalele de încărcare. Cu o atenție deosebită la detalii, puteți evita greșelile obișnuite și puteți evita interpretarea greșită a datelor Western blot.
Ce tip de metodă este western blot?
O western blot este o metodă de laborator folosită pentru a detecta anumite molecule de proteine dintr-un amestec de proteine. Acest amestec poate include toate proteinele asociate cu un anumit tip de țesut sau celulă.
Se poate cuantifica Western blot?
Western blots sunt detectate cu anticorpi specifici la proteina țintă care sunt cunoscuți ca anticorpi primari. … Cu toate acestea, este, de asemenea, posibil să se utilizeze Western blotting pentru a oferi cuantificare precisă a proteinelor din probe, pentru a evalua modificările nivelurilor de expresie a proteinelor (2).
Poate Western blot cuantifica proteinele?
După liza celulelor, este important să determinăm concentrația totală de proteine a probei. Cuantificarea precisă a probei vă va permite să încărcațicantitatea adecvată de proteine pe fiecare bandă.