Datele de densitometrie generate pentru Western blot sunt folosite în mod obișnuit pentru a compara abundența proteinelor între mostre. … Datele de densitometrie neliniară au fost observate atunci când Western blot au fost detectate folosind fluorescență sau chemiluminiscență în infraroșu și în diferite condiții SDS-PAGE.
Ce este analiza densitometriei?
Densitometria este măsurarea cantitativă a densității optice în materialele sensibile la lumină, cum ar fi hârtia fotografică sau filmul fotografic, din cauza expunerii la lumină.
Cum folosiți densitometria în imaginea J?
Densitometrie folosind ImageJ
- Faceți clic pe centrul pătratului și trageți-l pe banda următoare. …
- Pentru ultima bandă, repetați procedura, dar apăsați Ctrl și 3 pentru a seta ultima bandă. …
- Utilizați instrumentul de linii pentru a desena liniile pentru a elimina fundalul benzii din calcule. …
- Accesați: Analyse→Gels→Label Peaks pentru a obține raportul.
Cum analizezi rezultatele Western blot?
Validați-vă instrumentele de cuantificare . De exemplu, rulați o pată în care benzile sunt încărcate cu 20 µg, 15 µg și 10 µg de proteine totale. După analiză, cuantificarea relativă a benzilor țintă ar trebui să fie 2, 1,5 și 1. Încercați diferite instrumente și setări de cuantificare până când puteți reproduce în mod fiabil rezultatele corecte.
Cum se cuantifică un western blot?
Pasul 1: Determinați fondul scăzutdensitățile proteinei de interes (PI) și controlul de normalizare (NC). Pasul 2: Identificați NC care are cea mai mare valoare a densității. Pasul 3: Împărțiți toate valorile NC la cea mai mare valoare a densității NC pentru a obține o valoare NC relativă.
