Încărcarea anticorpilor de control sunt controale importante, deoarece indică încărcarea egală a probelor în toate godeurile. Controalele de încărcare indică, de asemenea, transferul adecvat al proteinelor pe membrană în timpul procesului de western blot. Controalele de încărcare sunt de obicei proteine cu o expresie ridicată și omniprezentă.
Ce face un control de încărcare?
Un control de încărcare este o proteină folosită ca control într-un experiment Western blotting. … Sunt folosite pentru a vă asigura că proteina a fost încărcată în mod egal în toate godeurile.
De ce folosim un control de încărcare în Western blot?
Controalele de încărcare au un al doilea rol ca control în western blot. Ele pot fi folosite pentru a verifica dacă a existat un transfer uniform de la gel la membrană pe întregul gel. Acest lucru este imperativ atunci când se fac comparații ale nivelurilor de expresie a proteinelor între probe.
Cum folosești controlul de încărcare în Western blot?
Semnalele de la comenzile de încărcare sunt utilizate de obicei pentru a normaliza semnalele de la proteinele de interes. Pentru a utiliza un control de încărcare în aceste scopuri, detectarea cu anticorpul proteic de control și anticorpul experimental ar trebui făcută pe aceeași pată. O varietate de proteine diferite sunt folosite ca comenzi de încărcare.
De ce este folosită actina ca control de încărcare?
Beta-actina, este de obicei folosit ca un control de încărcare pentru Western Blot pentrunormalizați nivelurile de proteine detectate confirmând că încărcarea proteinelor este aceeași în gel.
