Deoarece DdNTP-urile au o moleculă de hidrogen (-H) în loc de o grupare hidroxil (-OH) atașată la 3'-C al dezoxiribozei sale, nu se poate lega de nicio nucleotidă primită. Prin urmare, adăugarea de DdNTP-uri în timpul replicării ADN poate fi folosită pentru a opri reacția de sinteză.
De ce sinteza ADN-ului se oprește atunci când un ddNTP este încorporat în catena de ADN în creștere?
Dacă nucleotida adăugată este o „dideoxinucleotidă” (Figura 6.29), capătul 3’ al catenei în creștere va avea acum un H, mai degrabă decât un OH. Acest lucru va împiedica adăugarea oricăror nucleotide suplimentare; adică sinteza ADN in vitro se va opri în acest moment.
Cum termină un ddNTP sinteza ADN-ului?
Când un ddNTP este încorporat într-un lanț de nucleotide, sinteza se termină. Acest lucru se datorează faptului că moleculei ddNTP îi lipsește o grupare hidroxil 3’, care este necesară pentru a forma o legătură cu următoarea nucleotidă din lanț.
De ce DdNTP-urile încheie procesul de replicare?
Metode de laborator în enzimologie: ADN
Dideoxinucleotide trifosfații sunt ușor încorporați într-un lanț de ADN în creștere, dar le lipsește gruparea hidroxil 3′ necesară pentru a permite lanțului să continueși termină eficient polimerizarea.
De ce dideoxinucleotidele împiedică replicarea ADN-ului?
Aceste ddNTP lipsesc o grupare 3′-OH necesară pentru formarea unei legături fosfodiester între douănucleotide, determinând oprirea extinderii catenei de ADN atunci când se adaugă un ddNTP.
