Cu toate acestea, atunci când spectrele de emisie se suprapun, poate fi detectată fluorescența de la mai mult de un fluorocrom. Pentru a corecta această suprapunere spectrală, se utilizează un proces de compensare a fluorescenței. Acest lucru asigură că fluorescența detectată într-un anumit detector derivă din fluorocromul care este măsurat.
De ce avem nevoie de compensare în citometria în flux?
Este necesară compensarea pentru un experiment de citometrie în flux din cauza fizicii fluorescenței. Un fluorocrom este excitat și emite un foton într-o gamă de lungimi de undă. Unii dintre acești fotoni se revarsă într-un al doilea detector, determinând ca probele cu un singur colorat să pară dublu pozitive.
Care este scopul principal al utilizării unei celule de compensare?
Scopul principal este de a permite măsurarea fluorescenței reale în canalul primar contaminat de scurgerea de la fluoroforii vecini. Prin urmare, compensarea corectează „pătrunderea” fluorescenței între fluorofori. Cu toate acestea, nu este perfect și nu poate remedia toate efectele nedorite.
Ce este matricea de compensare?
O matrice de compensare este calculată folosind fișiere de control fluorescent cu o singură culoare care sunt colectate pe ImageStream sau FlowSight cu toate canalele colectate și în absența iluminării câmpului luminos sau SSC.
Ce este compensarea spectrală?
Utilizarea spectralecompensarea înseamnă că semnalul de la detectoare non-primare este încă folosit pentru a îmbunătăți semnalul real al markerilor, acolo unde este posibil. Eșantioanele de control primare sunt utilizate pentru denumirea parametrilor. … Eșantioanele utilizate pentru detectoarele primare ajută și la denumirea acelor parametri după compensarea spectrală.
