Cu cât greutatea moleculară este mai mare, cu atât bobina este mai lungă și molecula merge mai încet. Deci, electroforeza + SDS se separă pe baza greutății moleculare, nu pe baza sarcinii native. Notă importantă: proteinele de aceeași lungime, de obicei, nu pot fi separate prin electroforeză pe gel + SDS.
Cum separă proteinele cu aceeași greutate moleculară?
Centrifugarea, electroforeza și cromatografia sunt cele mai comune tehnici pentru purificarea și analiza proteinelor. Centrifugarea separă proteinele în funcție de viteza lor de sedimentare, care este influențată de masa și forma lor.
Ce tehnici separă proteinele pe bază de taxă?
Proteinele pot fi separate pe baza încărcăturii lor nete prin cromatografie cu schimb ionic. Dacă o proteină are o sarcină pozitivă netă la pH 7, se va lega de obicei la o coloană de sferele care conține grupe carboxilat, în timp ce o proteină încărcată negativ nu se va lega (Figura 4.4).
Care dintre următoarele tehnici este cel mai potrivită pentru a separa proteinele în funcție de greutatea moleculară?
Metodele de cromatografie bazate pe partiție sunt foarte eficiente în separarea și identificarea moleculelor mici ca aminoacizi, carbohidrați și acizi grași. Cu toate acestea, cromatografiile de afinitate (de exemplu, cromatografia cu schimb de ioni) sunt mai eficiente în separarea macromoleculelor ca acizi nucleici și proteine.
Ce tip de coloanăcromatografia separă proteinele pe baza greutății moleculare?
Cromatografia cu filtrare pe gel (GF) separă proteinele numai pe baza dimensiunii moleculare. Separarea se realizează folosind o matrice poroasă la care moleculele, din motive sterice, au grade diferite de acces - adică moleculele mai mici au acces mai mare și moleculele mai mari sunt excluse din matrice.
