Deoarece sonicarea poate degrada proteinele și denatura epitopi proteici, am evaluat apoi impactul sonicării asupra integrității proteinelor.
Sonicarea poate deteriora proteinele?
Răspunsuri populare (1)
Protocol standard de sonicare nu poate provoca fragmentarea proteinelor- energia este prea scăzută. Nici măcar nu ar trebui să-i provoace denaturarea. Poate fi denaturat atunci când îl suniți prea mult și supraîncălziți proba. Dacă utilizați cromatrografie cu nichel, alte benzi pot fi pur și simplu impurități.
Sonicarea poate rupe legăturile peptidice?
Sonicația nu poate rupe în mod normal structura primară a unei proteine deoarece acea structură (secvența de aminoacizi) este construită din legături covalente care sunt de multe ori mai puternice decât legăturile de hidrogen, iar sonicarea poate furnizează energia necesară pentru a rupe acele legături.
Sonicația sparge membrana nucleară?
A sonicare scurtă cu energie scăzută poate perturba membrana plasmatică fără a rupe prea multe membrane mitocondriale sau nucleare, care cedează mitocondriile tact.
Este necesară sonicarea pentru extracția proteinelor?
Solubilizarea detergentului (de exemplu, SDS) care este necesară pentru izolarea proteinelor membranei are ca rezultat un adeziv ca lizat, în principal din cauza acizilor nucleici. Prin urmare, sonicarea este necesară în astfel de cazuri pentru a perturba acești acizi nucleici. Sonicarea generează multă căldură și nu este bună pentrumulte proteine.
