Produsul digestiei de restricție poate fi depozitat cu ușurință la -20 C. La 4 C ar fi bine, dar pentru a vă asigura că nu există activitate și nicio activitate stele este se recomandă menținerea la -20 C.
Cum stocați ADN-ul digerat?
Încercați să păstrați felia de gel în frigider peste noapte sau chiar să topiți felia în tampon și să o înghețați la -20°C sau -80°C. Degradarea ADN-ului va avea loc în aceeași viteză și în aceleași condiții ca și ADN-ul solubil, așa că utilizați o temperatură mai rece pentru o depozitare mai lungă.
Ce înseamnă ca o plasmidă să fie digerată?
ADN-ul plasmid purificat este digerat cu 1 sau mai multe enzime de restricție (RE) selectate pentru a da un model distinct de benzi de ADN care este ușor de rezolvat prin electroforeză. … De obicei, sunt selectate enzimele de restricție care intră în site-ul de clonare multiplă (MCS) și au ca rezultat un model de diagnostic de 2-5 benzi ușor de rezolvat.
Cum depozitați plasmidele linearizate?
Dacă sunteți îngrijorat de efectele în aval ale TE, depozitați ADN-ul la o concentrație mai mare și diluați atunci când este necesar sau utilizați „TE scăzut”, care este 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. când ADN-ul sau ARN-ul este curat, acesta poate fi păstrat la -20C timp de mai multe luni, fără nicio degradare.
Cât timp poți păstra rezumatul restricțiilor?
Pro-Tip În funcție de aplicare și de cantitatea de ADN din reacție, timpul de incubare poate varia de la 45 de minute până la peste noapte. Pentru rezumatele diagnostice, 1-2 ore esteadesea suficient. Pentru digerările cu >1 µg de ADN folosit pentru clonare, se recomandă să digerați timp de cel puțin 4 ore.
